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酶解羽毛粉的检测

发布时间:2020/9/26 文章来源:恒铭饲料

一、 原理:

利用三氯乙酸作蛋白质沉淀剂,将酶解蛋白中的蛋白质和肽链较长的肽沉淀,并将

其中的短链小肽用酸溶解出来,经离心、过滤、消化、蒸馏,测定上清液中的蛋白质含

量占原样品粗蛋白含量的百分比,即发酵豆粕中酸溶蛋白含量。

二、 试剂及仪器:

1、250ml 三角瓶;

2、10ml,50ml 移液管;

3、离心机,4000r/min 以上;

4、半微量粗蛋白质测定试剂和装置;

5、15%三氯乙酸溶液(TCA 溶液);

三、 方法:

1)准确称取样品 6.0000g 于 250ml 烧杯中,加入 15%TCA 溶液 50.00ml,混合均匀,于磁力搅拌

器上搅拌 30 分钟,静置 5min。

2)将溶液转移,4000r/min 离心 10 min,取全部上清液用干滤纸过滤。

3)准确移取上述滤液 10.00ml 于消化管中(可将消化管放到电炉子上,慢火将溶液蒸至近干,

直接加 15ml 硫酸和 6.4g 催化剂),按测定粗蛋白质的方法消化、蒸馏,测定其蛋白质含量,同

时做空白试验。

四、 结果:

酸溶蛋白含量 X ,数值以质量分数表示,按式( 1 )计算:

X =W1/W2*100

式中:

W1—处理后的上清液中的粗蛋白质含量,%;

W2—样品中总的粗蛋白质含量,%。

W1 = (V2-V1)×C×0.014×6.25 ×100 (V′/V =10ml/50ml)

m×V′/V

重复性:A)每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为结果。2

备注:

1. 15%三氯乙酸溶液(TCA 溶液):称取三氯乙酸 150g,定容至 1L。

2. 样品的粒度要统一:粉碎过 0.25 mm 孔径的样品筛,充分混匀。

3. 酸溶蛋白含量与温度的关系:用磁力搅拌器搅拌时,不能设置温度。室温也会对结果有影响,室温越高,检测结果越高。

4. 酸溶蛋白含量与时间的关系:搅拌完后,要马上离心,否则会使结果偏高。

本内容由安丘市恒铭饲料有限公司技术部整理归纳,并做相关推介,如有相关问题请致电咨询。