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怎样判定是否是酶解羽毛粉

发布时间:2020/9/29 19:21:04 文章来源:恒铭饲料

检测:  因为羽毛粉酶解的好坏与蛋白含量、新鲜度高低、灰分等含量无关,但酶解可以产生的中间产物有很多极易消化吸收的中间产物胨、肽等,所以我们以测定小肽含量和体外胃蛋白酶消化率同时作为检测依据,

①、小肽含量测定:饲用小肽产品的小肽含量是表现小肽产品中的“肽”而非“原蛋白”或“游离氨基酸”的一个最重要的技术指标。蛋白质经蛋白酶水解,其中间产物为胨、肽等,最终产物为氨基酸,肽产品的总蛋白质含量包括未被水解的蛋白质和所有水解中间产物,如部分水解蛋白、胨、肽及游离氨基酸的总量,但小肽的分子量小于2000道尔顿,所以小肽含量指标反应了产品汇总小肽的实际含量。肽含量是通过检验产品中酸溶蛋白质和游离氨基酸含量,经过计算差值而得。酸溶蛋白质是指能够溶解于15TCA(三氯乙酸)溶液的可溶性蛋白,测定中除去了未水解的较大分子量蛋白质,其结果显示出产品中(分子量在2000Dalton以下的)肽的含量。

②、水解羽毛粉的酸溶蛋白为4%,而酶解羽毛粉的酸溶蛋白含量一般在8%以上。

③、水解羽毛粉的体外蛋白酶消化率70-80%,酶解羽毛粉的体外蛋白酶消化率85-90%

注:检测参考(GB/T 22492-2008 B.4.1 大豆肽粉和QB/T2653-2004)

一、 原理:

利用三氯乙酸作蛋白质沉淀剂,将酶解蛋白中的蛋白质和肽链较长的肽沉淀,并将

其中的短链小肽用酸溶解出来,经离心、过滤、消化、蒸馏,测定上清液中的蛋白质含

量占原样品粗蛋白含量的百分比,即发酵豆粕中酸溶蛋白含量。

二、 试剂及仪器:

1、250ml 三角瓶;

2、10ml,50ml 移液管;

3、离心机,4000r/min 以上;

4、半微量粗蛋白质测定试剂和装置;

5、15%三氯乙酸溶液(TCA 溶液);

三、 方法:

1)准确称取样品 6.0000g 于 250ml 烧杯中,加入 15%TCA 溶液 50.00ml,混合均匀,于磁力搅拌

器上搅拌 30 分钟,静置 5min。

2)将溶液转移,4000r/min 离心 10 min,取全部上清液用干滤纸过滤。

3)准确移取上述滤液 10.00ml 于消化管中(可将消化管放到电炉子上,慢火将溶液蒸至近干,

直接加 15ml 硫酸和 6.4g 催化剂),按测定粗蛋白质的方法消化、蒸馏,测定其蛋白质含量,同

时做空白试验。

四、 结果:

酸溶蛋白含量 X ,数值以质量分数表示,按式( 1 )计算:

X =W1/W2*100

式中:

W1—处理后的上清液中的粗蛋白质含量,%;

W2—样品中总的粗蛋白质含量,%。

W1 = (V2-V1)×C×0.014×6.25 ×100 (V′/V =10ml/50ml)

m×V′/V

重复性:A)每个试样取两个平行样进行测定,以其算术平均值为结果。2

备注:

1. 15%三氯乙酸溶液(TCA 溶液):称取三氯乙酸 150g,定容至 1L。

2. 样品的粒度要统一:粉碎过 0.25 mm 孔径的样品筛,充分混匀。

3. 酸溶蛋白含量与温度的关系:用磁力搅拌器搅拌时,不能设置温度。室温也会对结果有影响,室温越高,检测结果越高。

4. 酸溶蛋白含量与时间的关系:搅拌完后,要马上离心,否则会使结果偏高。